從雌性草地夜蛾蛹中分離得到的昆蟲細(xì)胞系（Sf）在桿狀病毒昆蟲細(xì)胞系統(tǒng)（Baculovirus‐insectcellsystem，BICS）中被廣泛用作重組蛋白生產(chǎn)的宿主。然而，在Sf細(xì)胞系中發(fā)現(xiàn)的新彈狀病毒（Sf‐RV）引起了人們對BICS生產(chǎn)的生物制劑安全性的擔(dān)憂。

《中國藥典》2020版新增了“生物制品病毒安全性控制”章節(jié)，強(qiáng)調(diào)了生物制品生產(chǎn)過程中潛在的病毒污染風(fēng)險(xiǎn)，并提出了全面的風(fēng)險(xiǎn)評估和控制措施，包括對原材料的來源控制、生產(chǎn)過程的病毒污染篩查、特定病毒清除工藝的驗(yàn)證以及對產(chǎn)品病毒污染的檢測。根據(jù)我國藥審中心發(fā)布的《生物組織提取制品和真核細(xì)胞表達(dá)制品的病毒安全性評價(jià)技術(shù)審評一般原則》，動(dòng)物源性細(xì)胞表達(dá)的生物制品必須執(zhí)行內(nèi)源性和外源性病毒檢測，并且需要對病毒滅活／去除工藝進(jìn)行驗(yàn)證。ISO224422-1中指出動(dòng)物源性醫(yī)療器械需對外源性病毒進(jìn)行控制。

對生產(chǎn)過程中Sf彈狀病毒的檢測是控制生物制品的病毒安全性風(fēng)險(xiǎn)、保證生產(chǎn)質(zhì)量的重要手段。

檢測限達(dá)到0.5copies/μL。

驗(yàn)證了27種Sf彈狀病毒的結(jié)構(gòu)類似物和常用的細(xì)胞系，均與Sf彈狀病毒檢測試劑無交叉反應(yīng)。

1. 一步法RT-qPCR試劑，提取好的核酸直接加入預(yù)混的PCR反應(yīng)液中，無需提前進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄，減少了操作步驟。

2. 檢測高效，全程僅需2小時(shí)，從樣本提取至結(jié)果出爐。

廣泛驗(yàn)證多種樣本類型，確保檢測靈敏度不受基質(zhì)影響。

1. 檢測試劑含內(nèi)部質(zhì)控 (IC) 和陽性質(zhì)控 (PC)，有效避免假陰性和假陽性結(jié)果的出現(xiàn)；

2. 采用UDG酶防污染系統(tǒng)，避免污染風(fēng)險(xiǎn)。

1. 凍融穩(wěn)定性：

試劑盒反復(fù)凍融3次、5次、7次、10次，檢測限樣本檢測結(jié)果為陽性，中值樣本Ct值精密度CV≤5%，說明試劑盒凍融10次內(nèi)，穩(wěn)定性良好。

2. 儀器適用性：

在ABI7500、ABlQuantStudio?5、Bio-RadCFX96、SLAN-96P、SLAN-96S、羅氏Lightcycler480Ⅱ等多種型號(hào)的設(shè)備上均能正常檢出。

參考文獻(xiàn)：

1.《中國藥典》2020版第三部-生物制品生產(chǎn)和檢定用動(dòng)物細(xì)胞基質(zhì)制備及質(zhì)量控制。

2.《中國藥典》2020版第三部-生物制品病毒安全性控制。

3.《生物組織提取制品和真核細(xì)胞表達(dá)制品的病毒安全性評價(jià)技術(shù)審評一般原則》。

4.《歐洲藥典》EP10。

5.《日本藥典（JP第17版）》。