前言

直接PCR（Direct PCR）是一種不經(jīng)核酸提取而直接對生物樣本進行擴增的反應，是目前分子診斷領(lǐng)域的熱門技術(shù)之一。與常規(guī)PCR的主要區(qū)別在于，樣本可不經(jīng)過核酸抽提，直接進行PCR反應，因此對于參與直接PCR反應的酶的耐受性和buffer的兼容性有較高的要求

傳統(tǒng)的PCR反應需要以高質(zhì)量的核酸為模板進行反應，如模板中有樣本抑制物或提取試劑組分殘留時就會抑制PCR反應的順利進行。而寶銳生物推出的用于PCR直擴的核酸檢測試劑含有創(chuàng)新型的獨特配方，可對生物樣本進行原位裂解、擴增，并保證結(jié)果的準確性。此技術(shù)大大降低了勞動強度，節(jié)約了人力成本和實驗資源，提高了檢測效率。

免提取 可凍干

全過程無加熱、無核酸提取純化。樣本可直接作為模板上樣進行qPCR檢測，即混即用；可提供常規(guī)型/可凍干型/防污染體系配方，規(guī)格支持個性化定制。

更穩(wěn)定 靈敏度高

HBV血漿/血清樣本最低檢測限為30IU/mL。

廣泛適用 兼容性強

DNA/RNA均可進行直擴檢測，兼容市面上常規(guī)熒光定量PCR儀器及快速熒光定量PCR儀

DNA直擴試劑

貨號：MD2091

2×SensiDirect Premix-UNG (Probe qPCR)

2×SensiDirect Premix Buffer(dUTP)         50×SensiDirect Enzyme/UNG Mix

測試報告

測試一

1.  DNA直擴試劑（MD2091）進行HBV、內(nèi)標基因雙重檢測；

2.  分別對比測試純化模板、血漿模板和血清模板。

1. 實驗方法

HBV純化模板的加量為10μL/T（25μL反應體系），血漿模板和血清模板的加量為6.25μL/T（25μL反應體系）。

擴增程序

SLAN-96P：50℃ 2min；95℃ 5min；50 Cycles（95℃ 10s，55℃ 40s）。

2. 實驗結(jié)果

 擴增曲線

Ct值統(tǒng)計

結(jié)果分析

1.  HBV血漿和HBV血清樣本擴增效果相當。

2.  從Ct值上看，HBV純模板擴增較HBV血漿或血清模板提前，但由每孔的當量模板量來計算，HBV純模板擴增效率與HBV血漿或血清模板相當。

測試二

DNA直擴試劑（MD2091）測試HBV血漿模板的線性范圍，評價試劑擴增效率。

1. 實驗方法

HBV血漿模板設置：1.6×10?IU/mL，2T；1.6×10?IU/mL，2T；1.6×10?IU/mL，2T；1.6×10?IU/mL，2T；1.6×103IU/mL，2T；

加樣量：6.25μL/T（25μL體系）。

擴增程序

SLAN-96P：50℃ 2min；95℃ 5min；50 Cycles（95℃ 10s，55℃ 40s）。

2. 實驗結(jié)果

擴增曲線

Fam通道標準曲線：

Ct值統(tǒng)計

結(jié)果分析

標準曲線相關(guān)系數(shù)-0.99967，相關(guān)性良好，結(jié)果可靠。試劑擴增效率99.045%，表示HBV血漿各濃度梯度的復孔重復性好、不同濃度的模板擴增效率較為一致，實驗結(jié)果穩(wěn)定可靠、可重復性好。

相關(guān)產(chǎn)品推薦

本系列未完待續(xù)，下期更精彩！