LAMP(Loop-mediated isothermal amplification)環(huán)介導(dǎo)恒溫擴增反應(yīng)是一種核酸擴增技術(shù)。
本試劑盒采用 LAMP 技術(shù),利用Bst2.0 DNA Polymerase 和特異性引物識別靶序列的6 個獨立區(qū)域,恒溫擴增產(chǎn)生雙鏈 DNA。擴增反應(yīng)過程中產(chǎn)生焦磷酸根,反應(yīng)后 pH 值會降低,因此可藉由 pH 指示劑的顏色變化進行結(jié)果的判讀。本試劑盒是以甲酚紅和苯酚紅混合試劑為 pH 指示劑,反應(yīng)前為紫紅色,陽性反應(yīng)后變?yōu)辄S色,陰性孔仍保持紫紅色。
Bst2.0 DNA 聚合酶來源于 Bacillus stearothermophilus DNA Polymerase I,具有 5’→3’ DNA 聚合酶活性和強鏈置換能力,無 5’→3’外切酶活性,無 3’→5’外切酶活性。與野生型 BstDNA 聚合酶、大片段相比,該酶可有效提高擴增速度、產(chǎn)量等。Bst 2.0 HS 是在 Bst 2.0 DNA 聚合酶的基礎(chǔ)上采用可逆性修飾技術(shù)獲得的熱啟動等溫聚合酶,能夠在室溫下完全封閉酶的活性,可在室溫下建立反應(yīng),防止非特異性擴增,提高反應(yīng)效率。另外,Bst 2.0 HS DNA 聚合酶不需要單獨的激活步驟。
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