核糖核酸酶(Ribonuclease,RNase)是?類催化 RNA 降解為小片段的核酸酶。RNase 家族包括 RNase A、RNase B、 RNase C、RNase H、S-RNase、RNase P、RNase T等。其中,RNase A是一種廣泛應(yīng)用的核酸內(nèi)切酶,RNase A 在嘧啶核苷酸殘基 C 和 U 的 3'端處高效且專一地催化單鏈 RNA 骨架上的磷酸二酯鍵的斷裂,形成具有 2',3'-環(huán)磷酸衍生物的寡聚核苷酸。目前,常見的 RNase 殘留檢測(cè)方法主要包括放射性同位素法、分光光度法、熒光淬滅方法和電化學(xué)法等等。
寶銳生物研發(fā)的RNase 殘留定量檢測(cè)試劑盒是一種用熒光法快速高靈敏檢測(cè) RNaseA 活性的試劑盒,靈敏度高,最低檢出限低至 0.078pg RNase。底物是一種合成的 RNA 寡核苷酸探針,其一端具有 FAM 熒光基團(tuán)(Fluorophore)又稱供體 (Donor),另一端具有TAMRA 淬滅基團(tuán)(Quencher)又稱受體(Acceptor)。這兩個(gè)基團(tuán)的吸收光譜有一定的重疊,當(dāng)這兩個(gè)熒光基團(tuán)間的距離合適時(shí),熒光能量由供體向受體轉(zhuǎn)移,導(dǎo)致供體熒光分子自身的熒光強(qiáng)度衰減。當(dāng)該底物被 RNase 切割后,底物首尾兩端分離,兩個(gè)基團(tuán)分開,F(xiàn)AM 的熒光不再被 TAMRA 淬滅,即可檢測(cè)到 FAM 的熒光,熒光信號(hào)的增加速率與酶的數(shù)量和活性呈正相關(guān)。
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